中国生物制品学杂志

2019, v.32(04) 434-438+444

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反向胶束电动毛细管色谱-直接紫外法测定天花粉中的氨基酸
Determination of amino acids in trichosanthin by reverse micellar electrokinetic capillary chromatography-direct ultraviolet spectrophotometry

齐烨迪;赖昕;周鑫悦;陈莉;林珠灿;余丽双;

摘要(Abstract):

目的建立检测天花粉中氨基酸的高效反向胶束电动毛细管色谱-直接紫外法,并进行验证。方法样品分离采用未涂层毛细管(75μm×60 cm,有效长度为49.5 cm),通过运行缓冲液,在一定电压下进样,检测波长为200 nm,样品浓度为50μg/m L,操作温度为25℃。对分离条件中运行缓冲溶液p H(10、11和12)、缓冲体系浓度(40 mmol/L KH_2PO_4-110 mmol/L Na OH、60 mmol/L KH2PO4-130 mmol/L Na OH、70 mmol/L KH_2PO_4-140 mmol/L Na OH)、缓冲液阳离子表面活性剂浓度[0.2、0.6、1、1.2 mmol/L十六烷基三甲基氯化铵(cetyltrimethylammonium chloride,CTAC)]、缓冲溶液有机添加剂浓度(5%、10%、15%、20%乙腈)、进样方式(电动进样:-10 k V进样5 s,压力进样:34.5 k Pa进样5 s)、分离电压(15、20、25 k V)进行优化。同时验证方法的线性、精密性及准确性。采用最适条件检测供试品天花粉中3种氨基酸分离情况。结果最适检测条件为:运行缓冲液为5%(v/v)乙腈、1 mmol/L CTAC、60 mmol/L KH2PO4-130 mmol/L Na OH(p H 11);压力进样:34.5 k Pa×5 s,分离电压:20 k V。瓜氨酸、天冬酰胺和γ-氨基丁酸3种氨基酸的峰面积和浓度均呈良好的线性关系,R~2均>0.99;峰面积RSD分别为4.7%、4.5%和3.8%,迁移时间RSD分别为0.62%、0.93%和1.10%;加标回收率在82.48%~111.16%之间。该方法可有效分离天花粉中的3种氨基酸。结论本实验建立的方法快速有效,且具有良好的精密性及准确性,可用于天花粉中氨基酸的快速测定。

关键词(KeyWords): 反向胶束电动毛细管色谱法;直接紫外法;天花粉;氨基酸

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 福建省科技厅项目(2016Y0054、2017Y0051、2017Y0050);; 福建省教育厅项目(JZ160445);; 福建中医药大学校管课题重点专项资助(X2017012-重点)

作者(Author): 齐烨迪;赖昕;周鑫悦;陈莉;林珠灿;余丽双;

Email:

DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002566

参考文献(References):

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