中国生物制品学杂志

2017, v.30(09) 969-972+976

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破伤风抗体体外结合ELISA检测方法的建立及初步验证
Establishment and validation of tetanus antibody in vitro binding enzyme-linked immunosorbent assay

董国霞;田霖;晁哲;侯启明;马霄;

摘要(Abstract):

目的建立破伤风抗体体外结合ELISA检测方法,并进行初步验证。方法将破伤风疫苗免疫后获得的小鼠血清与破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)在体外进行结合,将结合后的血清转移至已包被的酶标板中,分别加入二抗、酶标抗体和底物等进行检测,建立破伤风抗体体外结合双抗夹心ELISA法。对建立的方法进行特异性、线性范围、检测限、重复性和准确性初步验证。结果建立的破伤风抗体体外结合双抗夹心ELISA法的标准曲线在浓度为0.016~1 U/ml之间时,可获得最佳线性,相关系数R=0.999 8;检测限为0.009 U/ml;与白喉-百日咳抗体无交叉反应;重复性验证中高浓度和低浓度质控血清的变异系数(CV)分别为4.467%和5.419%;准确性验证中高浓度和低浓度质控血清的相对偏差分别为-8.03%和-14%。结论建立的破伤风抗体体外结合ELISA检测方法具有良好的特异性、重复性和准确性,为破伤风疫苗效价检测新方法的建立奠定了基础。

关键词(KeyWords): 破伤风抗体;体外结合;酶联免疫吸附测定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 中国食品药品检定研究院中青年发展研究基金资助(2013NB3)

作者(Author): 董国霞;田霖;晁哲;侯启明;马霄;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.001871

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