中国生物制品学杂志

2021, v.34(03) 276-281

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过表达脑红蛋白对大鼠脊髓损伤的神经保护作用及其机制
Neuroprotective effect of overexpression of neuroglobin on spinal cord injury in rats and relevant mechanism

王浩;张雄;唐宁曼;王晓林;

摘要(Abstract):

目的观察过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后神经功能的影响,并探讨其可能的机制。方法将90只SD大鼠随机分为5组:假手术组、SCI模型组(SCI)、阴性对照组(NC)、AAV-Ngb组(Ngb)和AAV-Ngb+LY249002组(Ngb+LY),每组18只。采用改良Allen′s法制备SCI模型,假手术组大鼠仅暴露T10脊髓背侧面,其余各组依次用微量注射器将生理盐水、AAV-Con、AAV-Ngb溶液和AAV-Ngb+LY294002液(5μmol/L)注入损伤脊髓T10所在节段的中点以及头尾两侧,于术后1、3、7、14、21、28 d,采用BBB(Basso Beattie Bresnaha)评分法评估各组大鼠的后肢运动能力;Tunel染色观察各组大鼠脊髓组织细胞的凋亡;caspase-3和caspase-9酶活性检测试剂盒检测各组大鼠脊髓组织中caspase-3和caspase-9的酶活性;Western blot检测各组大鼠脊髓组织中caspase-3、caspase-9、T(p)-Akt蛋白的表达。结果与假手术组比较,SCI和NC组大鼠的BBB后肢运动功能评分均显著降低(P <0.01),细胞凋亡数明显增多(P <0.01),而与凋亡密切相关的caspase-3和caspase-9酶活性以及蛋白表达水平也显著升高(P <0.01),而p-Akt的蛋白表达水平明显降低(P <0.01);注射Ngb后,BBB评分在术后7、14、21、28 d明显升高(P <0.01),凋亡细胞数和caspase-3、caspase-9的酶活性、蛋白表达水平均明显下降(P <0.01),p-Akt的表达也显著升高(P <0.01),且呈时间依赖性(P <0.01);而注射Akt抑制剂LY249002后,Ngb的作用部分被显著抑制(P <0.05)。结论过表达Ngb可通过激活PI3K/Akt通路抑制大鼠脊髓神经细胞的凋亡,从而对SCI发挥神经保护作用。

关键词(KeyWords): 脑红蛋白;脊髓损伤;细胞凋亡;PI3K/Akt通路

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然青年科学基金(81100948)

作者(Author): 王浩;张雄;唐宁曼;王晓林;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.003287

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