中国生物制品学杂志

2012, v.25(05) 589-592

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hDNMT1基因抑制对胆管癌细胞中p16和RASSF1A基因甲基化的影响
Effect of hDNMT1 gene on methylation of p16 and RASSF1A genes in hilar cholangiocarcinoma cells

李修红;罗放;向吉锋;王济明;

摘要(Abstract):

目的运用siRNA抑制肝门部胆管癌QBC939细胞系中人DNA甲基转移酶1(Human DNA methylation trans-ferase 1,hDNMT1)基因的表达,探讨hDNMT1基因沉默后对QBC939细胞抑癌基因p16和RASSF1A去甲基化的影响,初步阐明其机制。方法根据GenBank中登录的hDNMT1 mRNA的核苷酸序列设计并合成发夹式siRNA序列,并以此为模板构建siRNA质粒,经脂质体转染QBC939细胞,通过RT-PCR检测hDNMT1、p16、RASSF1A基因mRNA转录水平;甲基特异性PCR(MSP)检测p16、RASSF1A基因的甲基化情况;MTT法检测QBC939细胞增殖活力。结果 sihDNMT1可有效抑制QBC939细胞中hDNMT1基因mRNA转录水平,同时上调p16、RASSF1A抑癌基因mRNA转录水平;sihDNMT1可促进p16、RASSF1A抑癌基因的去甲基化,并抑制QBC939细胞增殖,增殖抑制率在转染后72 h达到峰值。结论 hDNMT基因引起的抑癌基因启动子区异常甲基化是促进肝门部胆管癌发生发展的一个重要因素,抑制hDNMT1基因的表达可促进抑癌基因的去甲基化,为肝门部胆管癌的基因治疗提供了新的思路。

关键词(KeyWords): DNA甲基转移酶;RNA干扰;甲基化;胆管癌

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 重庆市教委资助课题(KJ090315)

作者(Author): 李修红;罗放;向吉锋;王济明;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2012.05.70.lixh.032

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