中国生物制品学杂志

2011, v.24(12) 1496-1499

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重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫水平ELISPOT检测方法的建立
Development of ELISPOT for Cellular Immunity of Recombinant Tiantan Vaccinia Virus-based AIDS Vaccine

李媛媛;凌媛;马志新;徐静;

摘要(Abstract):

目的建立检测重组痘苗病毒(Recombinant Tiantan vaccinia,rTV)艾滋病疫苗细胞免疫水平的ELISPOT方法。方法 rTV艾滋病疫苗经皮内注射BALB/c小鼠,免疫后1~6周,采集小鼠脾细胞,ELISPOT法检测小鼠细胞免疫水平,确定最佳检测时间,并对免疫剂量、肽库刺激浓度进行优化。应用ELISPOT方法对3批rTV疫苗成品进行检测,验证该方法的适用性;按现行检定标准对同批疫苗进行重复检测,验证该方法的重复性;应用ELISPOT和ICS方法同时对rTV疫苗进行检测,验证该方法与ICS法的相关性。结果 rTV艾滋病疫苗最佳免疫剂量为50μl/只,免疫后4周,混合多肽库刺激终浓度为4μg/ml,淋巴细胞分泌IFNγ的水平较高;ELISPOT法适用性和重复性较好,且与ICS法具有较好的相关性(r=0.767,P<0.05)。结论已成功建立了检测重组痘苗病毒艾滋病疫苗细胞免疫水平的ELISPOT方法。

关键词(KeyWords): 痘苗病毒;艾滋病疫苗;细胞免疫;ELISPOT

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2008-ZX10001-010)

作者(Author): 李媛媛;凌媛;马志新;徐静;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2011.12.121.liyy.021

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