中国生物制品学杂志

2017, v.30(03) 258-263

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中度嗜盐菌Halobacillus Y5甘氨酸甜菜碱转运蛋白opuD基因的克隆及功能分析
Cloning and functional identification of glycine betaine-cholinecarnitine transporter opuD gene from Halobacillus Y5

王艳红;曹宁;贾桂燕;余丽芸;姜巨全;

摘要(Abstract):

目的克隆中度嗜盐菌Halobacillus Y5甘氨酸甜菜碱转运蛋白(betaine-choline-carnitine transporter,BCCT)opu D基因,对其结构及蛋白功能进行分析,并通过耐盐碱特性试验明确其功能。方法将经过Sau3AⅠ部分酶切回收的Halobacillus Y5基因组总DNA,与用Bam HⅠ酶切并去磷酸化的线性p UC18载体连接,电转化法导入E.coli KNabc感受态细胞中,涂布在含0.2 mol/L Na Cl、Amp~(50)的LBK固体培养基上,筛选阳性克隆,提取质粒测序后,进行生物信息学分析及耐盐碱特性检测。结果已从中度嗜盐菌-喜盐芽孢杆菌Halobacillus Y5中成功克隆了1个新的耐盐碱基因,将其命名为HY5_opu D,该基因是1个新的甘氨酸甜菜碱转运蛋白基因,其编码的蛋白氨基酸序列和结构不同于以往报道的Opu D转运蛋白,且该基因能够使KNabc在0.2 mol/L Na Cl、5 mmol/L Li Cl及碱性p H 8.0环境下生长。结论成功克隆了1个新型的opu D转运蛋白基因,为开发利用中度嗜盐菌的耐盐碱基因奠定了理论基础。

关键词(KeyWords): 中度嗜盐菌;甘氨酸甜菜碱转运蛋白;基因克隆

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 大庆市指导性科技计划项目(szdfy-2015-41);; 黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(12541597)

作者(Author): 王艳红;曹宁;贾桂燕;余丽芸;姜巨全;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.001680

参考文献(References):

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