中国生物制品学杂志

2008, (02) 133-135

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甲型流感病毒HA基因核酸疫苗表达载体的构建及表达
Construction and Expression of Recombinant Plasmid Containing Influenza A Virus HA Gene

张艳;赵大鹏;戚凤春;汪春义;张雪梅;范洪学;王坤;

摘要(Abstract):

目的构建含有甲型流感病毒HA基因的核酸疫苗表达载体,转染COS-7细胞,并检测目的蛋白的表达。方法将甲型流感病毒New Caledonia/20/99(H1N1)接种鸡胚后,收获尿囊液,提取流感病毒总RNA,RT-PCR法扩增HA基因。经亚克隆后获得质粒pMD-T/HA,酶切鉴定后测序,将其与质粒pVAX1分别双酶切后连接,构建甲型流感病毒表达载体pVAHA。脂质体法转染COS-7细胞,并检测目的蛋白的表达。结果扩增出1700 bp片段,与预期的HA基因大小相符,测序结果与GenBank报道一致,酶切鉴定表明甲型流感病毒表达载体pVAHA构建正确,Western blot检测证明了流感病毒HA蛋白的表达。结论已成功构建了甲型流感病毒HA基因核酸疫苗表达载体pVAHA。

关键词(KeyWords): 甲型流感病毒;HA基因;核酸疫苗;表达载体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 张艳;赵大鹏;戚凤春;汪春义;张雪梅;范洪学;王坤;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2008.02.58.zhangy.016

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