中国生物制品学杂志

2006, (01) 34-37

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人体β-防御素-3突变基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
Cloning of Site-directed Mutant of Human β-Defensin-3 Gene and Its Expression in E.coli

魏葆珺;韩跃武;

摘要(Abstract):

目的对人体β-防御素-3基因进行定点突变,并在E.coli中表达。方法从人正常皮肤组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增编码β-防御素-3成熟肽的cDNA,测序正确后,设计含突变位点的引物,用PCR重叠延伸法对β-防御素-3成熟肽cDNA进行定点突变,将突变产物克隆至pUC18,并在E.coli中融合表达。结果测序结果表明,经RT-PCR所得的β-防御素-3成熟肽序列与GenBank中报道的序列完全一致。经过突变,β-防御素-3成熟肽第29位谷氨酰胺密码子由CAG突变为精氨酸密码子CGA,其余核苷酸序列均未发生变化。将突变β-防御素-3基因在E.coli中诱导表达后,可见突变β-防御素-3蛋白表达。结论已成功克隆并表达了β-防御素-3突变体基因。

关键词(KeyWords): 人体β-防御素-3;基因突变;基因克隆;测序;表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 甘肃省自然科学基金资助项目(3ZS041-A25-055)

作者(Author): 魏葆珺;韩跃武;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2006.01.39.weibj.010

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