中国生物制品学杂志

2011, v.24(11) 1351-1354

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无血清摇动悬浮培养富集乳腺癌干细胞
Enrichment of Breast Cancer Stem Cells by Serum-free Shaking Suspension Culture

闫文星;陈玉丙;张红梅;国春龙;王铁君;

摘要(Abstract):

目的探讨不同培养条件下乳腺癌MCF-7细胞的分裂特点,建立快速、有效的乳腺癌干细胞富集方法。方法将MCF-7细胞分别采用完全培养基静置培养(A组)、完全培养基摇动培养(B组)、细胞因子静置培养(C组)和细胞因子摇动培养(D组)12、24、36 h,倒置相差显微镜下观察各组细胞分裂情况,计算克隆形成率,采用流式细胞术检测CD44+/CD24-/low细胞亚群的比例变化。结果 B组和C组培养12 h,棒状分裂细胞约占30%;24 h后分别约占50%和60%;36 h后形成大的细胞克隆。D组培养12 h,棒状分裂细胞约占50%;24 h后约占80%,可见多个细胞克隆;36 h后克隆细胞数减少。D组培养12 h,CD44+/CD24-/low细胞亚群比例(8.05%)为B组(0.99%)的8倍,C组(3.80%)的2.1倍;培养24 h,D组(15.24%)为B组(4.83%)的3倍,C组(2.30%)的6倍;培养36 h,D组CD44+/CD24-/low细胞亚群比例降至9.68%,约为B组(0.95%)和C组(1.03%)的9倍。结论在细胞因子摇动培养条件下,MCF-7细胞分裂加快,分裂象增多,细胞系中CD44+/CD24-/low亚群比例增加较快,干细胞池增加明显,表明无血清摇动悬浮培养为富集乳腺癌干细胞的快速、有效的方法。

关键词(KeyWords): 乳腺肿瘤;干细胞;培养基,无血清;悬浮培养;摇动培养;富集

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 吉林省科技发展计划项目资助(200705224)

作者(Author): 闫文星;陈玉丙;张红梅;国春龙;王铁君;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2011.11.108.yanwx.036

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