中国生物制品学杂志

2007, (10) 725-728+740

[打印本页] [关闭]
本期目录(Current Issue) | 过刊浏览(Past Issue) | 高级检索(Advanced Search)

人血管抑制因子Vasostatin(120~180aa)的真核表达、纯化及活性鉴定
Eukaryotic Expression,Purification and Activity of Recombinant Human Vasostatin(120~180aa)

刘建巨;王建文;宋娅莉;

摘要(Abstract):

目的利用毕赤酵母表达系统表达人血管抑制因子Vasostatin(120~180aa),经纯化后,观察其抑制血管内皮细胞增殖的活性。方法采用PCR技术扩增出人血管抑制因子Vasostatin(120~180aa)的全长cDNA序列,将其克隆至真核表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母KM71,以甲醇诱导表达,并进行Western blot检测及金属螯合层析纯化。采用MTT法检测纯化的血管抑制因子对血管内皮细胞增殖的抑制作用。结果重组表达质粒pPIC9K-Vasostatin(120~180aa)经菌落PCR、酶切和测序鉴定,证明构建正确。经Western blot检测可见一条特异条带,纯化后的蛋白纯度达88.76%,浓度为300μg/ml,在体外可抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖。结论人血管抑制因子Vasostatin(120~180aa)可在毕赤酵母中以分泌形式表达,并具有抑制血管内皮细胞增殖的活性。

关键词(KeyWords): 血管抑制因子;真核表达;金属螯合层析;血管内皮细胞;活性

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11521164)

作者(Author): 刘建巨;王建文;宋娅莉;

Email:

DOI: 10.13200/j.cjb.2007.10.27.liujj.002

扩展功能
本文信息
服务与反馈
本文关键词相关文章
本文作者相关文章
中国知网
分享