中国生物制品学杂志

2021, v.34(04) 383-389

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模块化HBc-VLPs载体微针疫苗的制备及其特性和免疫效果分析
Preparation,characteristics and immune effect of modular HBc-VLPs carrier microneedle vaccine

刘地;高惠仙;燕平梅;李娜;李博;武晓英;

摘要(Abstract):

目的制备模块化HBc-VLPs载体微针疫苗,并分析其特性和免疫效果。方法通过定向改造hbc的基因序列,制备HBc(A80C)单体蛋白,纯化后的单体蛋白自组装形成HBc-VLPs纳米载体。利用Sulfo-SMCC将含有-NH2的流感病毒模式抗原肽M2e锚定于HBc-VLPs表面的Cys位点,制备M2e-HBc-VLPs模式抗原。以快速溶解材料为基质,将抗原微粒混合于基质中,制备涂层微针疫苗,并进行凝胶穿刺、皮肤穿刺及疫苗释放试验,Western blot分析M2e-HBc单体的抗原性。将剂量分别为50和100μg/只的微针涂层疫苗经皮内免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清特异性抗体效价,流式细胞术检测小鼠T淋巴细胞变化。结果 HBc(A80C)单体组装形成了粒径约为30 nm的HBc-VLPs球形载体。凝胶、皮肤穿刺试验表明,抗原能够到达表皮层,并在15 min内完成90%以上的释放。偶联M2e抗原能与相应抗体发生特异性结合,疫苗能够有效刺激小鼠产生抗原特异性IgG抗体,并在一定程度上激活机体的细胞免疫,验证了模式疫苗的有效性。结论具备定点偶联功能的HBc-VLPs载体能够搭载多种抗原模块,形成针对性的疫苗,缩短疫苗在制备、评价等方面所需时间,加快疫苗的研发流程。通过微针进行皮肤免疫,能够实现大规模的快速接种。本研究为HBc-VLPs作为模块化疫苗载体奠定了基础,可促进模块化微针疫苗的研发。

关键词(KeyWords): 模块化疫苗;微针;乙型肝炎病毒核心蛋白;病毒样颗粒;疫苗载体

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 山西省高等学校科技创新项目(2019L0821)

作者(Author): 刘地;高惠仙;燕平梅;李娜;李博;武晓英;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.003305

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