中国生物制品学杂志

2005, (05)

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同源比较法克隆单抗CAb-1重链可变区基因
Cloning of Gene Encoding Variable Region of Heavy Chain from McAb CAb-1 by Homologous Comparison Approach

杨向民,姚西英,邢金良,张思河,冯媛,陈志南

摘要(Abstract):

目的获得抗人大肠癌单抗CAb-1重链可变区VH的准确基因。方法结合生物信息学同源比较分析,利用高兼并的FR15′端处引物扩增的单抗CAb-1的VH基因,并与数据库中序列比对,在同源性最高的抗体序列的信号肽处二次设计引物,用RT-PCR法获得抗体基因VH的准确序列。结果选定了与已知抗体VH高度同源的序列进行引物设计。凝胶电泳可见预期大小DNA条带。经测序表明,配对于信号肽处的扩增产物不仅与配对于抗体可变区FR1的结果一致,而且也纠正了配对于CAb-1的VH的FR1的兼并引物所引入的氨基酸突变。结论所优化设计的引物能够扩增完整的抗人大肠癌单抗CAb-1重链可变区基因,为小分子工程抗体改造奠定了基础。

关键词(KeyWords): 重链可变区;兼并引物;FR1区;同源序列

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation):

作者(Author): 杨向民,姚西英,邢金良,张思河,冯媛,陈志南

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DOI: 10.13200/j.cjb.2005.05.30.yangxm.008

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