中国生物制品学杂志

2020, v.33(06) 705-708+713

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长效重组人生长激素-Fc融合蛋白纯化工艺的建立
Development of purification procedure for long-acting recombinant human growth hormone-Fc fusion protein

郭胜苍;俞露;富瑞丽;王莹;刘玉林;张宇;王江林;刘涵;

摘要(Abstract):

目的建立长效重组人生长激素-Fc(recombiant human growth hormone-Fc,rhGH-Fc)融合蛋白的纯化工艺。方法 rhGH-Fc融合蛋白细胞培养液经离心、低pH处理、过滤、浓缩预处理后,再经Protein-A亲和层析、CM阳离子交换层析、Q HP阴离子交换层析进行纯化,同时检测rhGH-Fc融合蛋白的蛋白含量、纯度、等电点及宿主蛋白、宿主DNA、Protein-A残留量等指标。结果 Protein-A亲和层析、CM阳离子交换层析、Q HP阴离子交换层析纯化产物的蛋白含量分别为145、132、92.4 mg,纯度分别为95. 40%、95. 90%和99. 19%,宿主蛋白残留量分别为2 500、864和71 ng/mg,宿主DNA残留量分别为329、0. 56和0. 12 ng/mg,Protein-A残留量分别为24. 5、3. 2和0 ng/mg。rhGH-Fc融合蛋白相对分子质量约97 300,等电点范围为5. 5~6. 5,可与鼠抗人生长激素(human growth hormone,hGH)抗体发生特异性结合。结论成功建立了rhGH-Fc融合蛋白的纯化工艺,该工艺的纯化产物回收率及纯度均较高,本实验为rhGH-Fc融合蛋白的大规模生产奠定了理论基础。

关键词(KeyWords): 重组人生长激素;抗体Fc段;融合蛋白;纯化;质量检定

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 吉林省重点科技攻关项目(20160204034YY)

作者(Author): 郭胜苍;俞露;富瑞丽;王莹;刘玉林;张宇;王江林;刘涵;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.003085

参考文献(References):

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