中国生物制品学杂志

2019, v.32(01) 10-14+19

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大肠埃希菌外膜囊泡作为新型外源质粒递送载体的研究
E. coli outer membrane vesicles as a novel exogenous plasmid delivery vector

舒聪妍;王世杰;高福兰;黄惟巍;马雁冰;

摘要(Abstract):

目的探讨大肠埃希菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)作为新型DNA疫苗递送载体的潜力及价值。方法从大肠埃希菌DH5α的培养上清中经过滤、超滤、超速离心等步骤收集天然分泌的OMVs,采用密度梯度离心法纯化OMVs。将纯化后的OMVs与哺乳动物吞噬细胞及非吞噬细胞进行体外孵育,观察不同细胞对OMVs的摄取效率。通过电击转化方式将带绿色荧光蛋白的真核表达质粒pIRES2-EGFP转入OMVs中,并与RAW264. 7细胞共孵育,观察OMVs携带真核表达质粒进入细胞并表达绿色荧光蛋白的情况。结果密度梯度离心法可有效纯化OMVs,纯化后的OMVs进入不同哺乳动物细胞的效率不同,进入吞噬细胞的效率高于非吞噬细胞,经电击转化后,质粒DNA可被导入OMVs中,并随吞噬细胞摄取及表达。结论约5 300 bp的真核表达质粒可用电击方式导入OMVs中,并通过OMVs介导该质粒在吞噬细胞中表达,提示OMVs具有作为新型质粒DNA递送载体的潜力。

关键词(KeyWords): 细菌外膜囊泡;质粒;递送系统;DNA疫苗

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 中国医学科学院医学与健康科技创新工程(2016-I2M-1-019);; 云南省科技计划项目(2016FA049);; 北京协和医学院病原生物研究所基本科研业务专项费项目(2014IPB107)资助

作者(Author): 舒聪妍;王世杰;高福兰;黄惟巍;马雁冰;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002431

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