中国生物制品学杂志

2004, (03) 155-157

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表达HIV-1 gp160膜蛋白靶细胞的制备及鉴定
Preparation and Identification of Target Cells Expressing HTV-1 gp160 Membrane Protein

王宏,金宁一,金洪涛,徐一鸣,张立树,宋英今

摘要(Abstract):

目的获得表达INV-1 gp160膜蛋白的靶细胞,用于HIV-1特异性细胞毒性淋巴细胞(CTL)和抗HIV-1重组毒素细胞杀伤活性检测。方法采用PCR方法,从质粒pJen 10中扩增HIV-1 gp160基因,插入pGEM-T载体,测序后克隆入pIRESl neo载体中构建成重组质粒pIRE160,酶切鉴定正确后,转染人肝癌细胞(SMMG-7721),CA18加压筛选至细胞不再死亡为止,并采用Western blot和间接免疫荧光法对制备的靶细胞进行检测。结果HIV-1 gp160在SMMC7721表面表达,并裂解为gp120和gp41蛋白。结论已成功得到稳定表达HIV-1 gp160的靶细胞,且表达的蛋白具有良好的特异性。

关键词(KeyWords): HIV-1;gp160;靶细胞;膜蛋白

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 吉林省重点项目(20010404)资助.

作者(Author): 王宏,金宁一,金洪涛,徐一鸣,张立树,宋英今

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DOI: 10.13200/j.cjb.2004.03.31.wangh.009

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