中国生物制品学杂志

2007, (02) 73-76

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新城疫强毒株F蛋白裂解位点串联基因的构建及其原核表达
Construction of Prokaryotic Expression Vector for F Protein Schizolysis Site Gene Cascade of Virulent Newcastle Disease Virus Strain

刘成宏;金扩世;金宁一;鲁会军;贾雷立;陈义锋;金明兰;姜鲲;

摘要(Abstract):

目的构建鸡新城疫(ND)强毒株多裂解位点串联基因表达载体,为建立NDV强弱毒株的ELISA鉴别方法奠定基础。方法人工合成一段包含4种不同NDV强毒株裂解位点的基因Fe(F prote in multitude epi-position),其中各裂解位点之间用Linker(GGGGS)使其串联,然后进行2倍和4倍拷贝,并定向克隆至原核表达质粒pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a(+)/2Fe和pET-28a(+)/4Fe,进行表达和Western blot鉴定。结果构建的原核表达重组质粒pET-28a(+)/2Fe和pET-28 a(+)/4Fe测序正确。Western blot检测结果表明,2Fe、4Fe蛋白均与新城疫强毒株F48E9阳性血清呈阳性反应,而与新城疫弱毒株V4阳性血清呈阴性反应。结论已成功构建NDV强毒株F蛋白裂解位点串联基因表达载体,为建立NDV强弱毒株的ELISA鉴别方法提供理论依据。

关键词(KeyWords): 新城疫;强毒株;裂解位点;串联基因

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 吉林省科技计划发展项目(20040560)

作者(Author): 刘成宏;金扩世;金宁一;鲁会军;贾雷立;陈义锋;金明兰;姜鲲;

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DOI: 10.13200/j.cjb.2007.02.6.liuchh.001

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