中国生物制品学杂志

2017, v.30(11) 1135-1139

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牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的可溶性表达
Soluble expression of E2 protein of bovine viral diarrhea virus

杨婷铄;王宇婷;辛慧颖;张金悦;于迪;于泓漪;闻晓波;冉旭华;倪宏波;

摘要(Abstract):

目的可溶性表达牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2蛋白。方法参考BVDV NADL株序列设计1对特异性引物,PCR扩增BVDV NADL株E2全长编码区片段,目的片段经限制性内切酶克隆入质粒p ET28a,经双酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒转化E.coli Rosetta(DE3)宿主菌,37℃IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析;表达的重组蛋白经Ni-NTA Purification System纯化后进行SDS-PAGE鉴定。结果表达的重组E2蛋白相对分子质量约45 000,主要以可溶性形式存在,表达量占菌体总蛋白的38.9%,可与BVDV阳性血清发生特异性反应,纯度达95%以上,浓度约3.8 mg/ml,产量可达4.96 mg/L细菌培养物。结论实现了可溶性重组BVDV E2蛋白在原核表达系统中的表达,并具有较好的生物学活性。

关键词(KeyWords): 牛病毒性腹泻病毒;E2蛋白;可溶性表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 黑龙江省大学生创新创业训练计划项目(201610223-021);; 黑龙江省农垦总局攻关课题(HNK125B-11-08A;HNK125B-11-02);; “十二五”农村领域国家科技计划课题(2012BAD12B03-3)

作者(Author): 杨婷铄;王宇婷;辛慧颖;张金悦;于迪;于泓漪;闻晓波;冉旭华;倪宏波;

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DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.001991

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