中国流行株HIV-1Gag蛋白在重组鸡痘病毒的表达及鉴定

目的 以鸡痘病毒为载体，表达ＨＩＶ－１　Ｇａｇ蛋白，进而研制ＡＩＤＳ疫苗。方法 以鸡痘病毒２８２Ｅ４株 非必需区ＴＫ基因为侧翼，插入ＶＶ突变型Ｐ７．５串联启动子和牛痘病毒Ａ包涵体晚期启动子与２０个串联的突变型 早期痘苗病毒Ｐ７．５启动子组成复合启动子及ＬａｃＺ报告基因构建重组表达质粒ｐＵＴＡＬ。在ＡＴ１－Ｐ７．５复合启动子 下游，插入编码中国流行株 ＨＩＶ－１　Ｇａｇ基因（Ｂ亚型），构建了重组表达质粒ｐＵＴＡＬ－Ｇａｇ。重组质粒Ｇａｇ与ＦＰＶ共 转染ＣＥＦ细胞，进行同源重组。通过ＢＵｄＲ加压筛选，Ｘ－ｇａｌ染色，获得重组鸡痘病毒ｖＵＴＡＬＧ，用于感染ＢＨＫ细胞 并免疫小鼠。结果　经Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测，重组病毒表达了Ｇａｇ蛋白相对分子质量分别为５５０００、４８０００、２４０００和 １７０００，为Ｇａｇ蛋白的Ｐ５５、Ｐ４８、Ｐ２４和Ｐ１７蛋白。重组病毒免疫小鼠可诱导产生特异性抗体。结论　所重组的病毒 成功地表达了目的蛋白并进行了正确加工。

人血管生成素基因的克隆与表达

目的 为了获得人的血管生成素基因，并在原核表达系统中进行表达。方法 利用ＲＴ－ＰＣＲ技术 从人的肝脏组织中扩增出Ａｎｇ基因片段，并将其克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体中进行序列分析，再亚克隆到原核表达到 ｐＥＴ２８ａ（＋）载体中。结果　构建了重组表达载体ｐＥＴＡ，转化宿主菌ＢＬ２１（ＤＥ３）后，经ＩＰＩＧ诱导，Ａｎｇ基因蛋白在 ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达了相对分子质量约为１７０００的重组蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描分析表明，外源蛋白的表达量 占菌体蛋白总量的１０．６４％。结论 Ａｎｇ基因的克隆与表达为进一步研究其生物活性及应用奠定了基础。

治疗用抗HFRS病毒单克隆抗体质量分析

非O1群霍乱弧菌O139型荚膜多糖的制备及生物学特性

目的 提取Ｏ１３９型霍乱弧菌荚膜多糖，并检测其理化特性及免疫原性。方法 采用Ｃａｔａｖｌｏｎ、冷 酚、不同浓度乙醇沉淀、离心等步骤精制Ｏ１３９霍乱弧菌荚膜多糖，用生物学、免疫学等方法分析检定。结果 提取 的霍乱Ｏ１３９型荚膜多糖具有良好的多糖特性、结构特征和免疫原性。结论 为组分疫苗的研制打下基础。

《中国生物制品学杂志》将于明年改为双月刊

CNTF工程菌培养及产物纯化

目的 建立ＣＮＩＦ生产工艺，获得高产量的ＣＮＴＦ活性蛋白质。方法 通过摇瓶和发酵罐培养研究 了培养基成分、ｐＨ、诱导时间对工程菌 ｐＢＶ２２０－ＣＮＴＦ／ＤＨ５Ａα生成和表达的影响，并对表达产物进行纯化和生物学活 性检测。结果 应用正交试验确定了培养基成分配比为酵母粉１０ｇ／Ｌ，葡萄糖８ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ４０．５ｇ／Ｌ，磷酸盐０．０５ｍｏｌ／Ｌ， ｐＨ７．４时最有利于工程菌的生长及ＣＮＩＴ的表达。ＣＮＴＴ纯化后纯度达９５％以上，并具有较高的生物学活性。结论 为ＣＮＴＦ的结构和功能的研究及临床应用打下基础。

可生物降解微球甲型肝炎减毒活疫苗口服免疫恒河猴的免疫应答

目的 探索用一种新型的甲型肝炎减毒活疫苗及其免疫途径。方法 用可生物降解的材料聚乳 酸／乙醇酸（ＰＬＡ／ＰＬＧ）包裹甲型肝炎减毒活疫苗，制成微球型疫苗，检测微球的大小及在体外病毒释放的状况，和口 服免疫恒河猴后病毒在体内繁殖及免疫应答状况。结果 微球大小在６～１０μｍ范围，体外病毒抗原释放长达２７ｄ 左右，体外抗原释放高峰在３～７ｄ，口服免疫恒河猴后，约１ｗ左右开始排毒，以后一直呈间断排毒。抗体应答于第 ３ｗ出现，高峰期在５～６ｗ，达１２６１ＭｍＩＵ／ｍｌ，随后逐渐下降，口服加强免疫后，抗体回升，野毒株攻击后，抗体再度回升 达１２４４ｍＩＵ／ｍｌ。结论 微球型甲型肝炎减毒活疫苗口服免疫恒河猴后，能引起一定水平的免疫应答。

乙肝病毒DNA疫苗诱导小鼠体液免疫应答

目的 通过ＤＮＡ疫苗诱生乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）特异性体液免疫应答。方法 将编码乙肝 病毒表面抗原的真核表达质粒免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，并分别于第１ｗ、第３ｗ后加强免疫１次，同时设对照组注射质粒 ｐｃＤＮＡ３．１。第２次加强免疫３ｄ后采血检测血清中 ＨＢｓＡｇ和 ＨＢｓＡｂ。结果 实验组２ｗ时检测到ＨＢｓＡｂ，２个月后达 到高峰。对照组未检测到 ＨＢｓＡｂ。实验组和对照组始终均未检测到 ＨＢｓＡｇ。结论 乙肝病毒 ＤＮＡ疫苗能引起小 鼠特异性体液免疫应答。

甲型肝炎减毒活疫苗检定方法精确度的探讨

目的 提高甲肝减毒活疫苗检定方法的精确度。方法 比较不同刑量组与剂量组不同的试验数，以 及采用点斜法与Ｒｅｅｄ－Ｍｕｅｎｃｈ法计算ＴＣＩＤ５０。结果 通过比较４种不同的试验设计，发现随着稀释倍数减小或／和各 稀释度试验管数增加，ＴＣＩＤ５０的标准误减小，以减小稀释倍数同时增加各稀释度试验管数，其标准误的缩小最为明显。 点斜法计算的ＩＣＩＤ５０９５％可信区间较Ｒｅｅｄ－Ｍｕｅｎｃｈ法为窄。结论 减小稀释倍数同时增加各稀释度试验管数，并采 用点斜法计算ＴＣＩＤ５０，能使疫苗检定方法的精确度满足规范化甲肝活疫苗滴定的要求。

HEV部分ORF_2重组蛋白的纯化及其在酶标试剂中的初步应用

目的 获得具有生物学活性的重组蛋白，用于制备抗－ＨＥＶ酶标试剂盒。方法 将插入的含ＨＥＶ 部分开放读码框２（ＯＲＦ２）的重组菌扩大培养，诱导表达，纯化，鉴定，组装酶标试剂盒。结果 纯化的重组蛋白经 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，在相对分子质量５６０００处有一明显的蛋白带，经ＣＳ－９３０薄层扫描纯度达９５％以上，经免疫印迹 分析，具有良好的免疫学特异性。此ＨＥＶ试剂盒，检测阳性病人血清样品阳性率为９４．７４％，检献血员血清样品阳 性率为５．４３％。结论 该纯化的ＨＥＶ部分ＯＲＦ２重组蛋白组装的试剂盒特异性及敏感性均较好。

检测人血白蛋白中铝含量的石墨炉原子吸收分光光度法的建立

目的 建立一种人血白蛋白铝含量的检测方法。方法 用石墨炉原子吸收分光光度法检测人血白 蛋白（ＨＡＳ）中的铝含量，并对该方法进行分析。结果 检测限度达１ｎｇ／ｍｌ，检测精确度的ＣＶ值为７．６２％，均达满意标 准。结论 该方法可检测出的铝含量符合ＷＨＯ铝含量应≤２００ｎｇ／ｍｌ的要求，可作为实验室常规的铝含量检测方法。

促红细胞生成素在老年肿瘤化疗后合并贫血中的应用

目的 观察促红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）治疗老年肿瘤化疗后贫血患者的效果。方法２６例老年肿 瘤化疗后合并贫血患者，采用ｒＨｕＥＰＯ２０００ＩＵ皮下注射，每周 ３次，４周为一疗程。结果 ２６例患者在 Ｈｂ、ＲＢＣ、 ＨＣＴ、ＲＣ均较前明显好转，生命体征较前更加稳定，血液粘度、生化、肝肾功能治疗前后无明显变化。结论 老年肿 瘤化疗后合并贫血的患者应用ｒＨｕＥＰＯ有一定疗效，并可减少输血的副作用。

结核病疫苗研究进展

关于召开第一届中国艾滋病性病防治大会的预通知

三价精制流行性感冒灭活疫苗的免疫效果观察