- 张爱利;翟丽;张永瑞;高艳章;潘玉卿;郭成斌;陆衍舟;杨伟;张曦;
目的 探讨泛素样修饰物激活酶1(ubiquitin-like modifier activating enzyme 1,UBA1)对急性髓系白血病（acutemyeloid leukemia,AML）细胞（HL60及THP-1细胞）增殖及凋亡的影响及其作用机制，以期评价将UBA1作为AML分子标志物和诊疗靶点的可能性。方法 通过shRNA干扰技术抑制HL60和THP-1细胞中UBA1的表达，筛选稳定转染细胞株，qPCR和Western blot法检测抑制效果。CCK-8法检测抑制UBA1对AML细胞增殖的影响；流式细胞术检测抑制UBA1对AML细胞凋亡的影响；Western blot法检测抑制UBA1对AML细胞凋亡蛋白（Bax、Bc12）、细胞周期调控相关蛋白（CDK4、CDK6和CyclinD1）、MAPK信号通路相关蛋白（P-ERK、P-JNK、P-P38MAPK、T-ERK、T-P38）表达水平的影响。结果 干扰UBA1表达后，HL60和THP-1细胞中UBA1基因mRNA转录及蛋白表达水平均显著降低（t=2.065~43.591,P均<0.05）；细胞增殖能力明显下降（t=12.274~17.252,P均<0.05），凋亡率显著升高（t=12.690~18.855,P<0.05）；促凋亡蛋白Bax表达水平显著上调（t=17.094~20.781,P均<0.01），抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著下调（t=42.494~53.050,P<0.01）；细胞周期调控蛋白CDK4、CDK6和CyclinD1表达水平均显著下降（t=12.193~51.666,P均<0.05）;MAPK信号通路中P-ERK和P-P38MAPK蛋白表达水平显著升高t=3.759~10.822,P均<0.05),P-JNK、T-ERK、T-P38蛋白表达水平差异无统计学意义（t=0.133~1.794,P均> 0.05）。结论 干扰UBA1表达可抑制HL60和THP-1细胞的增殖，并促进其凋亡，作用机制可能与MAPK信号通路相关蛋白P-ERK和P-P38MAPK表达水平升高有关。
2025年04期 v.38 399-406页 [查看摘要][在线阅读][下载 1381K] [下载次数：122 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ] - 孙凯丽;徐秀丽;李春阳;卢佳;王泽鋆;
目的 比较K18-hACE2转基因小鼠感染SARS-CoV-2原型株Prototype及其变异株Delta和Omicron BF.7后肺组织的免疫反应，以期为相关药物的研发提供实验依据。方法 K18-hACE2转基因小鼠经滴鼻方式感染Prototype、Delta及Omicron BF.7株后7 d，无菌取小鼠肺组织，qPCR法检测小鼠肺组织中病毒核酸拷贝数及细胞因子基因的表达水平；HE染色法检测小鼠肺组织损伤情况。结果 Delta组小鼠肺组织病毒核酸拷贝数明显高于Prototype及Omicron BF.7组（t=5.419~6.908、P均<0.01）;Delta组小鼠肺组织中干扰素γ(interferon γ,IFN γ)及白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)基因表达水平明显高于Prototype及Omicron BF.7组（t=3.990~7.282,P均<0.05），肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及IL-5基因表达水平明显高于Prototype组（t分别为7.108和2.908,P均<0.05）；且3组小鼠肺组织切片均可见明显病毒感染相关病变。结论 Delta变异株导致K18-hACE2转基因小鼠肺组织的炎性反应最强，致病性最高，其次为原型株和变异株Omicron BF.7。
2025年04期 v.38 407-412页 [查看摘要][在线阅读][下载 1215K] [下载次数：70 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：12 ] - 徐登峰;张素辉;余远迪;杨欢;赵自亮;沈克飞;
目的 提取化脓隐秘杆菌肝素高亲和蛋白（Trueperella pyogenes heparin high affinity protein,THHAP），经鉴定后，分析其免疫原性，为探讨化脓隐秘杆菌与肝素间的相互作用提供参考。方法 用细菌膜蛋白提取试剂盒提取化脓隐秘杆菌表面蛋白，经肝素琼脂糖珠吸附、1 mol/L NaCl溶液洗涤、8 mol/L尿素溶液洗脱后，提取THHAP，经SDS-PAGE和液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）法鉴定后，进行生物信息学分析。将THHAP免疫15只雌性昆明小鼠，第2次免疫后2周，5只小鼠采集眶前静脉血，分离血清，10只小鼠经腹腔注射9×10~8CFU化脓隐秘杆菌，检测免疫保护效果及抗血清溶血抑制活性。结果 THHAP形成1条约占蛋白质总含量98%的主带；检测到1 767条溶血素（pyolysin,PLO）多肽，占检测到的多肽数的98.06%(1 767/1 802)。THHAP由1种细胞壁蛋白、11种分泌蛋白、1种脂蛋白、7种膜蛋白、1种细胞质蛋白构成，其中8种蛋白质可能是具有免疫保护性的抗原。用THHAP免疫的小鼠（9/10）能够抵抗化脓隐秘杆菌感染，其抗血清表现出溶血抑制活性。结论从化脓隐秘杆菌表面蛋白中成功提取了THHAP,PLO是其主要成分，能诱导小鼠产生保护性免疫应答。
2025年04期 v.38 413-417页 [查看摘要][在线阅读][下载 938K] [下载次数：109 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ]
- 赵丹华;刘欣玉;黄艳秋;所玥;李玉华;吴小红;
目的 建立新型冠状病毒mRNA疫苗模板DNA残留数字微滴PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法并进行验证，为新型冠状病毒mRNA疫苗的质量控制提供技术支持。方法 以不同质粒共有DNA序列复制子为靶基因，设计特异性引物和探针，建立新型冠状病毒mRNA疫苗模板DNA残留ddPCR检测方法，并进行线性范围、重复性、准确度、中间精密度、耐用性、检测限、定量限、专属性验证；用建立的方法检测不同企业、不同变异株新型冠状病毒mRNA疫苗模板DNA残留。结果 选择58℃为建立的ddPCR法的最优退火温度。检测拷贝数在19~4 729 copies/μL范围内，线性良好，R~2=0.999 9；重复性变异系数（coefficient of variation,CV）<10%；准确度回收率在99%~121%之间，CV<10%；中间精密度和耐用性CV均<10%；建立的方法检测限为9 copies/μL，定量限为26 copies/μL，专属性良好。4家不同企业、不同变异株新型冠状病毒mRNA疫苗模板DNA残留CV均≤15%，回收率在79%~138%之间。结论 建立的新型冠状病毒mRNA疫苗模板DNA残留ddPCR检测方法灵敏度高、稳定性好、专属性强、准确度高，适用于新型冠状病毒mRNA疫苗模板DNA残留量检测。
2025年04期 v.38 442-449页 [查看摘要][在线阅读][下载 977K] [下载次数：291 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：16 ] - 王立志;杨嘉明;李本强;李小翠;梁秋怡;邓钦培;
目的 建立检测重组蛋白药物中L-蛋氨酸亚砜亚胺（（L-methionine sulphoximine,MSX）残留量的反相离子对色谱法，并进行验证及初步应用，以期为相关产品的质量控制提供参考。方法 筛选色谱分析方法并优化流动相条件（离子对试剂、流动相pH和盐浓度），建立检测重组蛋白药物中MSX残留量的反相离子对色谱法，并对方法进行专属性、系统适用性、线性、检测限与定量限、精密性、准确性及溶液稳定性验证。采用该方法检测重组蛋白药物工艺步骤样品和原液中MSX残留量。结果 确定的色谱条件为：使用Hypersil GOLD~(TM)C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）；以50 mmol/L磷酸二氢钠（含5 mmol/L 1-辛烷磺酸钠，pH 2.0）-乙腈（体积分数85∶15）为流动相进行等度洗脱；流速为0.6 mL/min；检测波长为200 nm；柱温为25℃；进样体积为50μL。该方法专属性、系统适用性良好；对照品在10~100μg/mL浓度范围内线性关系良好，相关系数（R）=0.999 95；检测限和定量限分别为5和0.5μg/mL；重组蛋白A和B供试品中均未检测到MSX，平行6份加样回收样品实测浓度相对标准偏差（relative stan-dard deviation,RSD）分别为1.3%和1.1%，回收率在94%~103%之间；重组蛋白A供试品加样回收样品于10℃放置0和12 h实测浓度RSD为2.1%。重组蛋白A供试品工艺步骤样品及原液、3批重组蛋白B供试品样品均未检测到MSX。结论 建立的反相离子对色谱法具有操作简便、灵敏度高的特点，可用于对重组蛋白药物中MSX残留量进行质量控制。
2025年04期 v.38 450-456+461页 [查看摘要][在线阅读][下载 908K] [下载次数：130 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：13 ] - 程宾;和文志;江宜恒;王莉;
目的 建立用于检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin inactivated poliovirus vaccine,sIPV）(Vero细胞)中2-苯氧乙醇含量的气相色谱法（gas chromatography,GC），并进行验证，以期为生物制品中2-苯氧乙醇含量的检测提供可靠的方法。方法 采用聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）GC柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）进行2-苯氧乙醇含量检测。色谱条件：载气为氮气，进样量为1μL，分流比为1∶10，载气流速为1 mL/min；程序升温：起始柱温为90℃，以每分钟10℃的速率升温至220℃，维持10 min，采用火焰离子化检测器（flame ionization detector,FID）采集信号。验证方法的线性范围、重复性、准确性及专属性。分别采用建立的方法及高效液相色谱法（high performance liquid chro-matography,HPLC）检测3批sIPV(Vero细胞)中2-苯氧乙醇含量，并进行比较。结果 对照品溶液在0.2~1.0 mg/mL浓度范围内，与峰面积呈良好的线性关系，线性方程为：y=4 021.44 x+97.07,R~2=0.998;6份供试品溶液中2-苯氧乙醇含量RSD<2.0%;9份供试品的高、中、低浓度加样回收率均在90%~110%范围内；对照品及供试品溶液均于9.1 min处可见2-苯氧乙醇色谱峰，阴性样品未见该色谱峰，对供试品无干扰。GC及HPLC法检测3批供试品中2-苯氧乙醇含量均值分别为（4.990±0.175）和（4.986±0.122）mg/mL，差异无统计学意义（t=0.045 6,P=0.967 8）。结论 建立的GC法具有良好的重复性、准确性及专属性，有望成为替代HPLC的新方法。
2025年04期 v.38 457-461页 [查看摘要][在线阅读][下载 867K] [下载次数：78 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 赵海平;杨宇;夏云空;赵磊;高志强;
目的 通过对不同工艺放大规模过程人凝血酶原复合物（prothrombin complex concentrate,PCC）样品的质量指标进行比较，评价PCC生产工艺放大过程中的可行性。方法 PCC工艺放大依次经过实验规模、中试规模、生产规模的制备阶段，分别对3个阶段对应的工艺控制点取样检测进行质量分析比较，同时按照《中国药典》三部（2020版）对不同规模制备的PCC成品进行检测，以评价生产工艺在规模放大过程中的稳定性以及法规符合性。结果 一次超滤后，3种不同规模过程样品人凝血因子Ⅸ效价、蛋白质含量间差异无统计学意义（F分别为1.066、0.590,P均>0.05）；人凝血因子Ⅸ回收率依次为（69.3±10.3）%、（73.9±11.1）%和（69.8±7.3）%，差异也无统计学意义（F=0.330,P > 0.05）。有机溶剂/去污剂（solvent-detergent,S/D）法处理后，3种不同规模过程样品pH稳定，人凝血因子Ⅸ效价、蛋白质含量间差异无统计学意义（F分别为1.414、0.542,P均> 0.05）。二次离子交换层析后，3种不同规模过程样品人凝血因子Ⅸ效价、比活性间差异无统计学意义（F分别为0.437、0.201,P均> 0.05），人凝血因子Ⅸ回收率分别为（90.6±6.7）%、（82.6±4.6）%和（87.2±6.1）%，差异也无统计学意义（F=2.513,P > 0.05）。原液阶段，3种不同规模过程样品人凝血因子Ⅸ效价、比活性间差异无统计学意义（F分别为0.187、0.135,P均>0.05）,pH稳定，人凝血因子Ⅸ回收率分别为（90.6±7.5）%、（97.2±8.3）%和（92.2±6.4）%，差异也无统计学意义（F=1.016,P > 0.05）。干热病毒灭活后，3种不同规模过程样品因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ效价间差异无统计学意义（F分别为0.11、0.473、0.818、0.244,P均> 0.05）。3种规模制备的PCC成品关键质量指标一致，均符合《中国药典》三部（2020版）相关规定。结论 建立的PCC制备工艺稳定可靠，重现性好，工艺放大过程可行。
2025年04期 v.38 462-466+472页 [查看摘要][在线阅读][下载 862K] [下载次数：98 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：15 ] - 刘琳琳;张廷辉;孙瑞欣;苏畅;刘冰莹;刘景会;
目的 建立反相高效液相色谱（reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC）法测定人干扰素α1b(human interferon α1b,hIFNα1b)喷雾剂中苯扎溴铵含量，并对方法进行验证及初步应用，以期为hIFNα1b喷雾剂中苯扎溴铵用量控制提供参考。方法 液相色谱条件为：ZORBAX 300SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）；流动相为乙腈∶5 mmol/L醋酸铵溶液体积分数为65∶35；检测时间为30 min；流速为1.0 mL/min；柱温为室温；紫外检测器波长为262 nm；上样量为20μL；等度洗脱。对方法进行系统适应性、专属性、线性、准确性、精密性、定量限、检测限及耐用性验证，并应用该方法检测3批hIFNα1b喷雾剂中苯扎溴铵的含量。结果 该方法检测苯扎溴铵的系统适用性和专属性良好；苯扎溴铵在10~100μg/mL范围内线性关系良好，相关系数（R~2）=0.999 7；准确性验证的总平均加标回收率为97.2%，相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为1.61%；重复性和中间精密度验证的RSD分别为3.36%和1.20%；定量限为0.02μg/mL，检测限为0.008μg/mL；流速、流动相pH及柱温在规定条件下轻微上下浮动对检测结果无明显影响。3批hIFNα1b喷雾剂中苯扎溴铵的含量分别为45.4、45.0和45.2μg/mL，在标示量40~60μg/mL的范围内。结论 RP-HPLC方法具有较好的专属性、准确性、精密性、耐用性，可用于hIFNα1b喷雾剂中苯扎溴铵含量测定。
2025年04期 v.38 467-472页 [查看摘要][在线阅读][下载 901K] [下载次数：103 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ]
- 黄天治;史新昌;周勇;
环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类具有环形编码结构的RNA，其特点是在RNA剪接过程中形成环状拓扑结构。相较于传统线性mRNA,circRNA表现出更好的稳定性和免疫原性，这些特性使其在疫苗、生物标志物和靶向治疗等多种领域具有广泛的应用前景。本文对circRNA的研究历程、体内外合成及降解、组成元件、生物学功能和应用等方面的研究进展作一综述，以期为其在疫苗设计与开发中的应用提供新的思路。
2025年04期 v.38 473-480+489页 [查看摘要][在线阅读][下载 1025K] [下载次数：394 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：16 ] - 于成;何润铭;牛红霞;
尿路感染（urinary tract infection,UTI）是泌尿系统的常见疾病，主要由尿路致病性大肠埃希菌（uropathogenicEscherichia coli,UPEC）等病原菌引起，严重影响患者生活质量并增加患尿源性脓毒血症的风险。抗生素治疗虽能缓解症状，但长期使用易导致耐药性和感染复发，因此研发UTI的新型防治方法十分必要。近年，UTI疫苗作为特异性预防手段取得了一定进展，主要分为全细胞/裂解物疫苗、减毒活疫苗和亚单位疫苗3类，全细胞/裂解物疫苗（如Uromune、Strovac、OM-89/UroVaxom）已上市，减毒活疫苗和亚单位疫苗（如ExPEC4V、ExPEC10V）仍处于临床前研究阶段。本文就UTI的发生机制及其疫苗的研究进展作一综述，以期为我国UTI疫苗的研发提供参考。
2025年04期 v.38 481-489页 [查看摘要][在线阅读][下载 934K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：22 ] - 赵钰;张博文;舒星富;张海霞;
乳铁蛋白（lactoferrin,LF）是转铁蛋白家族一种具有多种生物活性的多功能糖蛋白，不仅可与病毒抗原决定簇结合抑制病毒与宿主细胞的识别结合，还可通过产生硫代巴比妥酸、丙二醛等较强抗氧化功效的物质抑制细胞癌变。近年来研究发现，LF除了具有抗病毒、抗炎症等多种功能外，还具有促进各类损伤组织修复的功能。本文主要对LF在皮肤、肌肉、骨骼、肠道、脑和牙龈损伤后修复及促修复中的作用作一综述，旨在阐明LF在医疗领域进一步的应用前景。
2025年04期 v.38 490-495页 [查看摘要][在线阅读][下载 844K] [下载次数：266 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：9 ] - 杜文雅;代禹美;吴利先;
肿瘤是一种高度异质性的疾病，肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophage,TAM）是肿瘤微环境中重要的免疫细胞，具有高度异质性及可塑性，肿瘤复发转移是导致癌症患者发病和死亡的重要原因。巨噬细胞来源的外泌体（macrophage-derived exosome,MDE）作为细胞间信号传递的信使，携带有母细胞的多种成分。大量研究表明，巨噬细胞的极化状态对肿瘤的进展转归发挥着调控作用，MDE与肿瘤的进展和巨噬细胞极化密切相关。MDE作为一种新的抗肿瘤策略，为肿瘤治疗提供了新的思路。本文对近年来工程化MDE在抗肿瘤方面的研究，以及M1和M2 MDE如何介导肿瘤的发生发展作一综述，以期为肿瘤治疗提供参考。
2025年04期 v.38 496-501+507页 [查看摘要][在线阅读][下载 879K] [下载次数：277 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 刘倩倩;孙兴璐;刘芳;陈彻;
肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是最常见的原发性肝脏恶性肿瘤，具有高转移率和复发率，是全球癌症相关死亡的主要原因之一。尽管检测和治疗手段有所改善，但HCC预后仍较差。近年来，外泌体作为一种新发现的肿瘤发生发展的细胞间通讯介质，通过传递生物活性物质来激活或抑制受体细胞中的各种信号转导途径，进而调节肝癌细胞包括增殖、侵袭、转移和耐药等多种恶性行为，但外泌体对HCC侵袭转移的机制尚不明确。本文就外泌体在HCC侵袭转移中的调控机制作一综述。
2025年04期 v.38 502-507页 [查看摘要][在线阅读][下载 868K] [下载次数：324 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：10 ] - 周慧;双慧;张夫坤;
带状疱疹（herpes zoster,HZ）是由长期潜伏在脊髓后根神经节或颅神经节内的水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus,VZV）经再激活引起的急性感染性皮肤疾病，通常引起皮肤出现红斑、丘疱疹等皮损，并伴有不同程度的疼痛或神经相关症状。HZ多发生于中老年和免疫力低下人群。我国人口老龄化日益严峻，随之带来的疾病负担和公共卫生问题逐渐凸显。本文就我国HZ流行病学特征及预防措施的研究进展作一综述，以期为我国HZ的防控提供参考。
2025年04期 v.38 508-512页 [查看摘要][在线阅读][下载 863K] [下载次数：885 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：17 ] 下载本期数据