疫苗研究

• 猴痘病毒A29L蛋白、A29L中和表位串联蛋白、A29L mRNA疫苗的制备及免疫原性评价

  吴佩璇;欧阳蕾;卢佳;师江龙;潘勇兵;

  目的 以猴痘病毒（monkeypox virus,MPXV）关键中和靶点A29L抗原为基础，制备A29L蛋白、A29L中和表位串联蛋白（Neu6）及A29L-mRNA-LNPs疫苗，并评价三者的免疫原性，以期为MPXV疫苗及抗体药物的研发提供实验依据。方法 采用E.coli原核系统表达A29L和Neu6蛋白并进行纯化，通过四肢和腹腔皮下共5个点免疫雌性BALB/c小鼠（每组5只），免疫3次后，经眼眶后静脉丛采血，分离血清。将A29L-mRNA模板序列克隆至质粒pBluescriptⅡSK（+），构建模板质粒pBlueScriptⅡSK(+)-A29L-mRNA，经体外转录合成A29L-mRNA，并加帽纯化，利用INano~(TM)L纳米药物制备系统包封制备A29L-mRNA脂质体纳米颗粒（lipid nanoparticles,LNPs），即A29L-mRNA-LNPs。通过5只雌性BALB/c小鼠背部肌内注射A29L-mRNA-LNPs，免疫3次后，经眼眶静脉丛采血，分离血清。采用间接ELISA法检测小鼠血清IgG效价，蚀斑减少中和试验（plaque reduction neutralization test,PRNT）检测小鼠血清中和抗体效价。结果 成功获得A29L和Neu6蛋白，纯度均> 90%，主要以包涵体形式表达，且可与鼠抗A29L单克隆抗体发生特异性结合。A29L-mRNA-LNPs粒径均一（71.35 nm），聚合物分散性指数（polymer dispersity index,PDI）为0.097，包封率为93%，体外转染HEK-293T细胞可有效表达A29L蛋白。A29L及Neu6组小鼠血清IgG抗体效价显著高于mRNA组（t分别为5.692和5.774,P均<0.001）;Neu6组小鼠血清中和抗体效价明显高于A29L及mRNA组（t分别为5.202和4.475,P均<0.01）。结论 A29L-mRNA-LNPs免疫原性较弱，提示单一抗原mRNA疫苗免疫效果有限；原核表达的A29L及Neu6蛋白具有良好的免疫原性，其中中和表位串联设计（Neu6）能显著提高中和抗体水平，未来需探索多抗原联合策略。Neu6蛋白有望成为MPXV疫苗及中和抗体开发的高效候选免疫原。

  2025年07期 v.38 769-775+780页 [查看摘要][在线阅读][下载 1045K]
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• 预防化脓隐秘杆菌感染保护性抗原的筛选

  徐登峰;赵自亮;张素辉;杨洪保;冉智光;沈克飞;

  目的 测定化脓隐秘杆菌（Trueperella pyogenes）已鉴定抗原和潜在抗原的免疫保护率，以期筛选出保护性抗原。方法 从化脓隐秘杆菌2012CQ-ZSH菌株基因组（GenBank:CP012649）注释的蛋白质中搜索ATP结合盒（ATP binding cassette,ABC）底物结合蛋白（substrate-binding protein,SBP），通过BLAST分析其基因保守性和菌株分布率。将筛选出的蛋白在GST融合蛋白表达系统中表达，经Gluthathione-Sepharose 4B纯化后免疫20只雌性昆明小鼠，以注射不含重组蛋白的PBS为对照组。第2次免疫后第14天，经腹腔注射致死剂量的化脓隐秘杆菌菌株ZSH-2020[(8.9±0.4)×10~8CFU]，记录攻击后21 d内致死小鼠数量，计算蛋白质保护率。将保护率大于80%的蛋白质判定为保护性抗原。结果 ALD74485[溶血素（pyolysin,PLO）]、ALD74170[铁结合蛋白（iron-binding protein,IBP）]、ALD74643、ALD73390、ALD73068、ALD73591、ALD73669编码基因保守且在菌株中广泛分布，制备其重组蛋白。重组PLO、IBP、ALD73390对攻毒小鼠的保护率分别为87.5%、81.25%、81.25%，高于其他蛋白的免疫保护率。结论 PLO、IBP、ALD73390是预防化脓隐秘杆菌感染的保护性抗原，由其构成的多组分疫苗可能提高化脓隐秘杆菌亚单位疫苗的有效性。

  2025年07期 v.38 776-780页 [查看摘要][在线阅读][下载 857K]
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基础研究

• 胎牛血清对人间充质干细胞质量评价的影响

  韩晓燕;吴婷婷;张可华;纳涛;张丽霞;孟淑芳;

  目的 探讨不同批次胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）对人间充质干细胞（human mesenchymal stem cells,hMSCs）产品质量评价的影响，为hMSCs产品研发和质量控制提供参考。方法 对hMSCs产品质量复核检验数据中含不同批次FBS培养基培养的标准细胞株CCRC-hMSC-S1免疫调控功能检测数据进行回溯性分析；将标准细胞株CCRChMSC-S1与5～6份异体来源的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）分别进行共培养，共培养体系中添加5种不同批次FBS(FBS-H、FBS-A、FBS-E1、FBS-E2、FBS-E3)，明确不同批次FBS对CCRC-hMSC-S1免疫调控功能检测值的直接影响；将8株不同个体来源的hMSCs在5种含不同批次FBS的培养基中培养14 d后，进行免疫调控功能和成骨诱导分化功能评价，以明确不同批次FBS长时间培养对hMSCs关键质量属性的影响。结果 在hMSCs与PBMC共培养体系中，FBS-H培养体系中的调节性T细胞（regulatory T-cell,Treg）增殖促进率检测值显著低于FBSA、FBS-E1、FBS-E2、FBS-E3培养体系（t分别为3.2、3.0、3.2、2.9,P均<0.05）,FBS-H培养体系中的T淋巴细胞增殖抑制率检测值显著高于FBS-A、FBS-E1、FBS-E2、FBS-E3培养体系（t分别为3.7、3.4、2.8、3.0,P均<0.05）;FBS-A长时间培养的hMSCs对Th1增殖的抑制能力明显低于FBS-H、FBS-E1、FBS-E2、FBS-E3长时间培养的hMSCs(t分别为3.0、2.4、3.7、3.3,P均<0.05);FBS-H长时间培养的hMSCs对T淋巴细胞增殖的抑制能力明显高于FBS-A、FBS-E1、FBS-E2、FBS-E3长时间培养的hMSCs(t分别为4.7、2.6、3.4、3.9,P均<0.05);FBS-E3长时间培养的hMSCs经成骨诱导分化后，茜素红S染色面积明显低于FBS-A、FBS-H、FBS-E1长时间培养的hMSCs(t分别为4.1、5.5、3.9,P均<0.01)。结论 在hMSCs类细胞治疗产品工艺研发中，需高度关注FBS成分对hMSCs质量评价特别是免疫调控功能和诱导分化功能的影响，应筛选合适批次的FBS应用于hMSCs产品研发和质量控制。

  2025年07期 v.38 781-789页 [查看摘要][在线阅读][下载 1087K]
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• 岩藻糖基转移酶7失调对脂多糖诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响

  易丽君;李红;

  目的 探讨岩藻糖基转移酶7(fucosyltransferase 7,Fut7)失调对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人单核细胞THP-1炎性反应的影响，以期为临床相关疾病的炎症发生机制的研究提供实验依据。方法 采用不同浓度LPS(0、0.5、1、2、4、10μg/mL)作用THP-1细胞，RT-qPCR法检测细胞中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因mRNA转录水平，确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度。采用最佳浓度LPS刺激THP-1细胞，建立细胞炎性反应模型，并采用RT-qPCR法检测Fut7、小分子药物唾液酸路易斯寡糖X(sialyl Lewis X,sLeX)和FutT活性抑制剂SGN-2FF对炎性细胞模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平的影响。结果 确定建立炎性细胞模型的LPS刺激浓度为4μg/mL。Fut7过表达及sLeX可明显增加LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平（t=3.93～30.05,P均<0.05）;Fut7抑制表达可明显降低LPS诱导THP-1细胞炎性反应模型中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α基因mRNA转录水平（t=6.89～39.50,P均<0.01）,SGN-2FF可明显降低IL-1β、IL-6、IL-8基因mRNA转录水平（t=5.17～6.44,P均<0.001），但TNF-α基因mRNA的转录水平则明显升高（t=12.31,P<0.001）。结论 Fut7过表达及sLeX可通过促进炎性细胞因子的表达加剧LPS诱导THP-1细胞的炎性反应；Fut7抑制表达及Fut7活性抑制剂SGN-2FF可有效缓解炎症，为炎性疾病治疗提供了新策略。

  2025年07期 v.38 790-795页 [查看摘要][在线阅读][下载 898K]
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• M细胞靶向融合肽SAM-GFP的原核表达、纯化及靶向性质鉴定

  吴静;张乐乐;张富蕊;刘昆梅;李润乐;汤锋;刘菁;郭乐;

  目的 原核表达M细胞靶向融合肽SAM-GFP，纯化后进行靶向性质鉴定，以期为M细胞靶向性幽门螺杆菌口服疫苗的研究奠定基础。方法 采用基于PCR的精确合成（PCR-based accurate synthesis,PAS）法合成GFP基因，克隆至载体pCzn1-SAM中，构建重组质粒pCzn1-SAM-GFP。将重组质粒转化至感受态E.coli Arctic Express，经IPTG诱导表达后，通过Ni-NTA亲和层析进行纯化，获得融合蛋白SAM-GFP，并进行12%SDS-PAGE、Western blot及荧光显微镜鉴定。利用小鼠回肠袢模型，通过免疫荧光染色法验证融合蛋白SAM-GFP的M细胞靶向性。结果 重组质粒pCzn1-SAMGFP经双酶切及测序鉴定，证明构建正确。融合蛋白SAM-GFP相对分子质量约54 900，主要以可溶性形式表达，纯化后纯度达94.5%，可与鼠抗6×His/GFP单克隆抗体特异性结合，荧光显微镜下可见绿色荧光。SAM-GFP能被小肠M细胞特异性摄取。结论 成功表达并纯化了具有M细胞靶向功能的融合蛋白SAM-GFP，为后续幽门螺杆菌口服疫苗的研发奠定了基础。

  2025年07期 v.38 796-801页 [查看摘要][在线阅读][下载 1053K]
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治疗制剂

• 治疗性肺结核DNA疫苗B21免疫剂量的筛选

  董佳欣;李军丽;郭晓楠;徐苗;李效池;夏焕章;赵爱华;

  目的 评价不同剂量治疗性肺结核DNA疫苗B21免疫小鼠后的免疫应答水平，以期为建立该疫苗成品效力质量控制方法提供免疫剂量选择的实验依据。方法 将25(LD)、50(MD)、100(HD)μg/100μL B21疫苗经SPF级雌性C57BL/6小鼠大腿内侧肌内注射，并联合电脉冲穿孔刺激，共免疫3次，每次间隔2周。末次免疫3周后，分离脾淋巴细胞及外周血血清，通过酶联免疫斑点（enzyme-linked immunosorbent spot,ELISpot）试验和流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测细胞免疫及免疫记忆效果，ELISA法检测体液免疫效果。结果 末次免疫3周后，HD组Ag85b及Rv1738特异性IFNγ斑点形成细胞（spot-forming cells,SFCs）数量均显著高于MD和LD组（F分别为11.22和15.89,P均<0.001）;Rv2029c特异性IFNγ SFCs数量显著高于MD组（F=5.761,P<0.05），与LD组差异无统计学意义（F=5.761,P > 0.05）。HD组3种抗原的IL-2 SFCs数量均显著高于MD与LD组（F=8.044～33.07,P均<0.05）。HD组分泌IFNγ的CD4~+T细胞比例显著高于MD及LD组（F=5.976,P<0.05）,3组间分泌IL-2的CD4~+T细胞比例差异无统计学意义（F=2.836,P > 0.05）。HD组IFNγ~+记忆T细胞（CD44~+CD62L~+/~-）比例显著高于MD及LD组（F=8.793,P<0.05）;HD组活化记忆B细胞（CD19~+CD27~+）比例显著高于MD和LD组（F=7.958,P<0.01）。3组B21蛋白特异性IgG抗体水平差异无统计学意义（F=5.765,P > 0.05）。结论 B21疫苗可有效诱导细胞免疫、体液免疫及免疫记忆反应，且呈剂量依赖性。100μg/100μL剂量诱导的免疫效果最优，ELISpot法检测IFNγ/IL-2 SFCs稳定性高、重复性好，有望作为B21疫苗效力质量控制的推荐免疫剂量、检测方法及评价指标。

  2025年07期 v.38 802-807+814页 [查看摘要][在线阅读][下载 957K]
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临床研究

• 2020—2022年吉林省适龄儿童接种含无细胞百白破成分疫苗的安全性评价

  程涛;黄飚;曹凤瑞;付思美;李柯霏;曹博楠;李春梅;孙朦;

  目的 评价2020—2022年吉林省适龄儿童接种含无细胞百白破成分疫苗的安全性，以期为后续预防接种工作中疫苗的安全使用提供参考。方法 通过吉林省免疫规划信息管理系统和国家免疫规划信息管理系统疑似预防接种异常反应（adverse event following immunization,AEFI）功能管理模块，收集2020年1月1日—2022年12月31日吉林省适龄儿童接种吸附无细胞百白破联合疫苗（diphtheria,tetanus and acellular pertussis combined vaccine,DTaP）、无细胞百白破-b型流感嗜血杆菌联合疫苗（diphtheria,tetanus,acellular pertussis and Haemophilus influenzae type b combined vaccine,DTaP-Hib）和无细胞百白破-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合疫苗[diphtheria,tetanus,pertussis(acellular,component),poliomyelitis(inactivated)vaccineand Haemophilustypebconjugatevaccine,adsorbed,DTaP-IPV/Hib]后发生AEFI的个案报告信息，采用描述性流行病学方法进行分析，并应用统计学方法比较组间差异。结果 2020—2022年吉林省适龄儿童接种DTaP、DTaP-Hib和DTaP-IPV/Hib共1 301 812剂次，共计报告AEFI个案3 132例（240.59/10万剂次），其中一般反应3 122例（99.68%,239.82/10万剂次），异常反应7例（0.22%,0.54/10万剂次），偶合症3例（0.1%,0.23/10万剂次）。3种含DTaP成分疫苗的AEFI报告发生率分别为257.00/10万剂次（3 025例）、175.61/10万剂次（34例）、69.26/10万剂次（73例），差异有统计学意义（χ~2=145.53,P<0.001）;3种含DTaP成分疫苗加强免疫AEFI报告发生率高于基础免疫，差异有统计学意义（χ~2分别为254.98、18.03、20.39,P均<0.05）；报告的AEFI病例以一般反应为主，包括发热、局部红肿、局部硬结等，主要发生于接种疫苗后0～1 d内。结论 2020—2022年吉林省适龄儿童接种DTaP、DTaP-Hib和DTaP-IPV/Hib的AEFI以一般反应为主，总体安全性良好。建议持续加强接种后AEFI监测，并优化被动监测系统以减少漏报偏倚。

  2025年07期 v.38 808-814页 [查看摘要][在线阅读][下载 909K]
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技术方法

• 脊髓灰质炎灭活疫苗D抗原含量表面等离子共振检测方法的建立及验证

  王玮;吴凡;杨家方;程晨;杨志泽;陈丽斐;罗文君;王永蓉;

  目的 建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（Sabin strain inactivated polio vaccine,sIPV）单价原液D抗原含量表面等离子共振（surface plasmon resonance,SPR）快速检测方法，并对方法进行验证。方法 分别将牛抗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原多克隆抗体标记至SPR芯片表面，捕获脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原，监测芯片表面信号响应值变化，确定D抗原含量与响应信号的关系，建立检测D抗原含量的SPR方法，并对方法进行线性、专属性、精密性、准确性验证。分别采用建立的SPR法和ELISA法检测6批次Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV单价原液D抗原含量，对2种方法的检测结果进行比较分析，以对该方法的可行性进行补充验证。结果 3个型别D抗原含量与响应值均呈较好的线性关系，相关系数（R~2）均在0.99以上；3个型别之间有一定程度的交叉反应，但交叉反应响应值明显低于阳性反应响应值；3个型别重复检测的相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）分别为3.1%、1.2%、1.4%，中间精密度验证的RSD分别为5.6%、2.0%、2.7%，均在8%以内，低于ELISA法可接受的15%以内；准确性验证的回收率分别为85.8%、105.1%、88.4%，在80%～120%范围内；6批次单价原液与ELISA法测定D抗原含量结果比较，Ⅰ、Ⅱ型差异无统计学意义（t分别为1.924和-0.901,P分别为0.083和0.389），Ⅲ型差异有统计学意义（t=-2.617,P=0.026）。结论 建立了可快速、大通量检测sIPVⅠ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原含量的SPR方法，该方法精密性和准确性良好，为疫苗生产全流程监测和质量检测提供了更多的方案。

  2025年07期 v.38 815-820页 [查看摘要][在线阅读][下载 901K]
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• 甘露聚糖肽发酵工艺的优化及其含量测定方法的比较

  张绪;李帆;曲宜庭;王军;张琨;陈思南;万一;

  目的 优化甘露聚糖肽生产菌株的发酵工艺，筛选更准确的甘露聚糖肽含量测定方法，以期为其规模化生产奠定基础。方法 通过16S rDNA测序及系统发育树对α-溶血性链球菌33#菌株进行分子鉴定。以甘露聚糖肽含量为指标，采用单因素试验方法优化菌株活化次数（1～4次）、接种时间（2、5、7、10 h）、发酵方式（静置培养、静置培养每6 h摇动1次、70 r/min摇床、200 r/min摇床）；正交试验法优化培养基组成及接种量；另通过在发酵前10 h动态控制pH，确定pH对甘露聚糖肽含量的影响。选取正交试验中的5组配方制备的发酵液上清，分别采用苯酚硫酸法和凝胶渗透色谱（gel permeation chromatography,GPC）法检测甘露聚糖肽含量，并进行比较。结果 经分子鉴定，甘露聚糖肽生产菌株为粪肠球菌。确定最佳菌株活化次数为3次，接种时间为5 h，发酵方式为70 r/min摇床培养，培养基组成为葡萄糖0.2%、酵母膏1%、牛肉膏0.3%、大豆蛋白胨0.6%、氯化钠0.5%，接种量为10%；动态调控pH至6.8～7.4后，甘露聚糖肽含量由（0.451±0.018）mg/mL（未调控pH）提高至（0.642±0.007）mg/mL。与苯酚硫酸法比较，GPC法可精准分离目标产物（经乙醇沉淀后），避免小分子糖干扰。结论 成功优化了甘露聚糖肽生产菌株的发酵工艺，并确定GPC为甘露聚糖肽含量更可靠的检测方法，为规模化生产奠定了基础。

  2025年07期 v.38 821-826+832页 [查看摘要][在线阅读][下载 1037K]
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• 腮腺炎病毒滴度ELISA检测方法的建立及其初步验证

  刘丽;李娟;刘悦越;赵荣荣;李长贵;权娅茹;

  目的 建立检测腮腺炎病毒滴度的ELISA方法，并进行验证，以缩短检定时间，为紧急出检提供技术支撑。方法 用腮腺炎疫苗病毒滴定参考品感染Vero细胞，以小鼠腹水为一抗，HRP标记的羊抗鼠IgG为二抗，对Vero细胞接种浓度、病毒接种后离心时间、病毒感染时间、抗体浓度、封闭条件、固定方法及时间等条件进行优化，建立检测腮腺炎病毒滴度的ELISA方法，并进行特异性、准确性、精密性、线性验证，同时与微量细胞病变法检测结果进行比较。结果 建立的ELISA方法步骤为：将浓度3×10~5个/mL的Vero细胞悬液加至96孔细胞培养板培养24 h；加入待测样本和参考品，236×g离心2 h，再继续培养48 h；用4%多聚甲醛固定10 min后，加入PBS-0.5%TritonX-100处理30 min；用5%脱脂奶粉封闭后，加入一抗（1∶1 000稀释）和二抗（1∶2 000稀释）；TMB显色，硫酸终止反应，检测A_(450)值。建立的方法对腮腺炎病毒具有良好的特异性；检测不同浓度参考品病毒滴度的相对偏倚（relative bias,RB）均小于10%；不同工作日重复6次检测参考品病毒滴度的变异系数（CV）为3.9%；方法的线性斜率为0.920 6，相关系数（r）为0.993 9。两种方法检测参考品病毒滴度结果差异无统计学意义（t=2.049,P > 0.05）。结论 建立的检测腮腺炎病毒滴度的ELISA方法特异性强，准确性和精密性好，且与微量细胞病变法检测结果具有较好的一致性，可明显缩短检定时间。

  2025年07期 v.38 827-832页 [查看摘要][在线阅读][下载 904K]
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• 《中国药典》四部（2020版）通则3408抗生素残留量检查方法中存在问题的验证及改进

  马步芳;刘慧;吴承芷;王立新;宁保明;常艳;

  目的 对《中国药典》四部（2020版）通则3408抗生素残留量检查法（培养法）中有关四环素残留量检查部分，由于阳性对照溶液不产生抑菌圈导致日常工作难以开展的问题进行验证，并尝试提出解决方案。方法 按《中国药典》四部（2020版）通则3408中四环素残留量检查方法规定的操作步骤，分别以藤黄微球菌[CMCC(B)28001]和金黄色葡萄球菌（ATCC 29213）为试验菌，采用管碟法对阴性和阳性对照品溶液进行抑菌性能验证。结果 以藤黄微球菌[CMCC(B)28001]为试验菌时，阴阳性对照品溶液均不产生抑菌圈，无法开展正常检验工作；以金黄色葡萄球菌（ATCC 29213）为试验菌时，阴性对照品溶液无抑菌圈，阳性对照品溶液出现抑菌圈，可满足方法适用性要求。结论 通过文献报道、日常工作经验和多次试验论证，藤黄微球菌[CMCC(B)28001]无法作为《中国药典》四部（2020版）通则3408中四环素残留量检查方法的指示菌开展相关检测工作，造成此情况的本质原因尚不明确。但为保证四环素残留量检查项目的顺利开展，建议将试验用菌株更换为金黄色葡萄球菌（ATCC 29213），同时其他试验条件不变。

  2025年07期 v.38 833-836+842页 [查看摘要][在线阅读][下载 938K]
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• 两种离心机来源冷沉淀用于人凝血因子Ⅷ生产的比较

  赵海平;关泽鑫;赵磊;唐兆虎;邓喜;黄洁;夏云空;

  目的 比较GQ142高速管式离心机、BKB45连续流离心机提取的人血浆冷沉淀的质量、离心效率及用于人凝血因子Ⅷ（human coagulation factorⅧ，FⅧ）生产过程的差异。方法 比较GQ142高速管式离心机、BKB45连续流离心机的主要功能、参数及离心效率；提取冷沉淀用于FⅧ生产，取样检测，比较冷沉淀的质量、收率、病毒安全性以及FⅧ生产过程产品及成品的质量和病毒安全性。结果 与GQ142高速管式离心机比较，BKB45连续流离心机功能更完善，工作效率更高；二者提取的冷沉淀外观正常，病毒安全性符合内部质量控制标准，冷沉淀收率差异无统计学意义（t=1.507,P > 0.05）;FⅧ活性回收率分别为（48.7±4.2）%和（49.2±5.4）%，差异无统计学意义（t=-0.250,P >0.05）。冷沉淀溶解液、层析后制品、超滤后制品FⅧ效价、蛋白质含量及FⅧ比活性间差异无统计学意义（t分别为-1.466、-2.084、-0.998,-1.701、-1.973、0.472,-0.975、1.116、-1.215;P均> 0.05）；层析后制品FⅧ回收率分别为（38.0±4.4）%和（38.7±5.6）%，差异无统计学意义（t=-0.275,P > 0.05）；超滤后制品pH稳定。成品外观正常，病毒安全性指标、FⅧ效价、水分、pH、蛋白质含量及FⅧ比活性均符合《中国药典》三部（2020版）质量标准。结论 与GQ142高管式离心机相比，BKB45连续流离心机在保证冷沉淀及FⅧ产品质量的同时，能够显著提升生产效率，适用于规模化生产。

  2025年07期 v.38 837-842页 [查看摘要][在线阅读][下载 872K]
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综述

• 聚合酶链式反应法在生物制品质量控制领域中的应用

  赵璇;纪宏;李文东;

  聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）是快速检测体外核酸片段的一项技术，具有高度的特异性、稳定性和可靠性，在药品质量控制领域具有越来越广泛的应用前景。本文总结了目前PCR技术在国内外生物制品质量控制中的主要应用并展望其发展前景，同时对国家药品标准提高课题——“四部通则1001 PCR法的修订”提出几点考量，以期提升药品监管中质量控制方面的工作，为《中国药典》中聚合酶链式反应法的修订及工业界质量控制方法的设定提供参考。

  2025年07期 v.38 843-849页 [查看摘要][在线阅读][下载 914K]
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• 非特异性重组核酸酶在生物制药工业中的应用

  周小天;王瑞峰;段生奎;温振国;

  非特异性核酸酶（non-specific nucleases,NSNs）广泛分布于动物、植物、细菌、真菌和病毒中，能非特异性地降解几乎所有形式的核酸，包括单链、双链、线状、环状和超螺旋形式的DNA和RNA，且对核酸的序列无要求。NSNs广泛用于生物制药工业和生物技术领域中各种需要去除核酸的步骤中。但目前仅有少数几个非限制性核酸酶在结构和功能方面进行了详细的研究。近年来，除了疫苗等传统领域，细胞和基因治疗等新兴领域的不断发展，一方面拓宽了核酸酶的应用范围，另一方面也对反应温度、盐浓度和金属螯合剂是否耐受等方面提出了新的挑战。本文总结了不同种属来源的NSNs，分析其同源性和结构催化特性，并对代表性NSNs，如Benzonase~?、Denarase~?和HLSAN~(TM)等的基本特性进行了综合对比，在此基础上，提出了生物制药工业用酶需要考量的各种因素，并对NSNs的未来研发趋势作一展望。

  2025年07期 v.38 850-857+865页 [查看摘要][在线阅读][下载 1127K]
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• 非抗菌药物对耐药金黄色葡萄球菌抗菌机制的研究进展

  孙滢滢;吴耀周;常彦斌;魏莲花;

  耐药金黄色葡萄球菌感染的日益增加严重威胁全球公共卫生安全。这些超级细菌对多种抗菌药物产生抗性，大大增加了治疗难度和成本。面对这一挑战，开发新型抗菌药物势在必行，但传统研发路径面临高成本、缺乏新靶点等阻碍。近年来，科研人员开辟了一条新途径：重新评估现有非抗菌药物（non-antibiotic drugs）的抗菌潜力。这种药物再利用策略利用已知药物的药理特性，为抗菌治疗提供了新思路。本文对15种非抗菌药物，包括双醋瑞因（Diacerein）、氯硝柳胺（Niclosamide）等，在对抗耐药金黄色葡萄球菌方面的作用机制作一综述。不仅为临床实践提供了新选择，也为解决细菌耐药性问题开辟了新途径。通过跨学科合作和创新思维，有望在对抗超级细菌中取得突破性进展。

  2025年07期 v.38 858-865页 [查看摘要][在线阅读][下载 960K]
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• 黏蛋白1靶点在肿瘤治疗中的研究进展

  吴贻淋;纪鑫;吴波;杨毅;

  黏蛋白1(mucin1,MUC1)为第一个被发现的MUC家族成员，其在胰腺癌、乳腺癌和结肠癌中表达过高。MUC1在肿瘤与正常细胞中的糖基化结构存在差异，可作为抗体识别的靶标。恶性肿瘤独特的3大特征是患者生存率低、侵袭周围组织和免疫逃逸，MUC1-C亚基（较短）参与了肿瘤抑制因子表达、侵袭周围组织和肿瘤免疫逃逸等重要生物学过程，因此，MUC1自被发现以来，一直作为研究肿瘤治疗的热门靶点。目前，针对MUC1靶点研发的免疫治疗策略主要包括单克隆抗体、双特异性抗体、抗体药物偶联（antibody-drug conjugate,ADC）、疫苗以及嵌合抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor T cell,CAR-T）免疫治疗。临床前研究数据表明，MUC1具有明显的抗肿瘤活性，是一个很好的肿瘤治疗靶点，特别在某些肿瘤上有很好的临床前治疗效果，如乳腺癌、结肠癌和卵巢癌等。本文主要从MUC1的结构与功能、MUC1与肿瘤的关系和靶向MUC1的肿瘤免疫治疗3方面对近10年来MUC1在肿瘤治疗方面的研究进展作一综述，以期为MUC1靶点的药物开发和治疗研究提供参考。

  2025年07期 v.38 866-875页 [查看摘要][在线阅读][下载 1038K]
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• 移植性宫颈癌动物模型构建的研究进展

  魏明婧;张秀丽;方秀丽;李少伟;

  宫颈癌是一种严重危害女性健康的恶性肿瘤，在基础设施较为有限的低收入和发展中国家，发病率和死亡率仍很高。移植性宫颈癌动物模型是研究宫颈癌预防和治疗的工具之一，可有效表征肿瘤特征，主要分为细胞系移植肿瘤（cell line-derived xenograft,CDX）模型、人源异种移植（patient-derived xenograft,PDX）模型和人源类器官移植（patient-derived organoids-based xenograft,PDOX）模型。本文对不同移植性宫颈癌动物模型的种类、构建方法和应用作一综述，为深入探讨宫颈癌的发生发展及治疗提供参考。

  2025年07期 v.38 876-881页 [查看摘要][在线阅读][下载 869K]
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专题报道

• mRNA疫苗关键技术专利分析

  赵建民;白晓岩;马璐;王艳丽;赵亚丽;姜紫耀;谷城橙;

  mRNA疫苗技术作为生物医学领域的重大突破，在传染病防治及肿瘤治疗中具有广阔的应用前景。但mRNA疫苗属于专利密集型产业，其核心技术专利主要被国外企业掌控。本文通过分析mRNA疫苗关键技术分支的全球专利申请态势、国内外企业产品与技术平台差异，构建涵盖专利布局密度与权利要求强度的专利壁垒指数模型，并结合龙头企业专利争端案例，系统梳理技术竞争格局，以期为我国企业突破专利壁垒、优化研发路径及风险防控策略提供思路。

  2025年07期 v.38 882-889页 [查看摘要][在线阅读][下载 1175K]
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• 已上市疫苗中代表性佐剂的研究现状及药学考虑

  金苏;郭胜楠;殷霄;张影;贾东晨;于鹏丽;吴舟一;鲁爽;李敏;

  佐剂可显著提升疫苗的免疫保护效果，是疫苗研发领域普遍关注的重点。但在研发过程中，佐剂筛选、特性、处方、质量等方面的研究常被忽视。本文通过回顾获批上市预防性疫苗中代表性佐剂的研发历程和现状，阐述佐剂能够提供的获益及其机制，以及不同类型佐剂在疫苗开发和应用中遵循的一般规律和不同特点，并从研发和监管等不同角度对佐剂类型筛选、疫苗抗原优化、佐剂和疫苗制剂研究等提出相关思考和建议，旨在为提升佐剂疫苗研发过程中的安全性、有效性及稳定性提供参考。

  2025年07期 v.38 890-896页 [查看摘要][在线阅读][下载 875K]
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